蜂王漿

蜜蜂(Apis mellifera) 蜂王漿上生物活性的篩查

在体外試驗中，對三种蜜蜂蜂王漿的各部分蛋白質的生物活性進行了各種篩選試驗。RJCP （蜂王漿粗蛋白質抽出物）可以促進Tn-5B1-4昆蟲細胞的細胞成長，在培養基裏加入這種蛋白質后， 平均每毫克蛋白質可以增加6.5倍的細胞倍增作用，而通常作爲細胞增殖添加劑的胎牛血清 只能增加2.55倍的細胞倍增作用。RJCP，RJP30及通過硫酸胺沉澱得到的RJP60也可以影響 Tn-5B1-4的細胞形態，並刺激這些細胞向基質的粘附作用。與胰島素對照組相比，RJP30使3T3-F442A 小鼠未成熟脂肪細胞轉化為成熟脂肪細胞的作用增加兩倍，同時並不增加已達到融合的未成熟 脂肪細胞的過度增長。與胰島素對照組類似的是，RJCP和RJP60蛋白部分可以促進成熟3T3脂肪細胞的形成。 RJP30蛋白部分對於宮頸癌細胞係Hela有細胞毒性，在處置7日后，與最初相比其濃度會減少2.5倍。 我們的研究結果顯示，蜂王漿内存在的多種生物活性可以影響昆蟲，小鼠和人類的癌細胞的細胞增殖， 細胞分化及細胞生存率。

Jelleines：蜜蜂(Apis mellifera)蜂王漿裏的抗微生物肽家族

從蜜蜂蜂王漿裏，用reverse phase-HPLC純化和Q-Tof-MS/MS排序離析出來四种抗微生物肽： PFKLSLHL-NH(2) (Jelleine-I)，TPFKLSLHL-NH(2) (Jelleine-II)，EPFKLSLHL-NH(2) (Jelleine-III)， 和TPFKLSLH-NH(2) (Jelleine-IV)。這些抗微生物肽被固定相萃取法合成，純化后又被用於不同的 生物學分析：抗微生物活性，肥大細胞脫顆粒過程和溶血反應。對於酵母菌，革蘭氏陽性細菌 和革蘭氏陰性細菌，Jelleine-I～III有特異的抗微生物活性。與此同時，Jelleine-IV在進行的 分析中沒有顯示出活性。蜂王漿裏提取的這種抗微生物肽與蜂蜜中提取出來的其他抗微生物肽沒有任何相似之処。

鑒定從蜂王漿抽出的膠原制造因子及其可能的機理

我們先前的研究顯示，在ascorbic acid-2-O-alpha-glucoside (AA-2G)存在的情況下， 蜂王漿可以促進由皮膚纖維芽母細胞產生的膠原產物。在本實驗中，我們用C-18反相柱色譜法 從蜂王漿的鹼性溶解物（alkali-solubilized fraction）離析出蜜蜂蜂王漿膠原產生的促進因子。 C-18反相柱色譜法的色譜沖洗曲綫資料和純化出來的HBRJ-CPF分子量與王漿酸内的同等物質相吻合。 然後，我們對蜂王漿内含的幾種有商業利用價值的脂肪酸的膠原制造活性進行了研究。 我們發現王漿酸和10-hydroxydecanoic acid可以以劑量依賴性的方式增加膠原產生。 另外，王漿酸還可誘導fibroblast cell line，NHDF產生轉化生長因子TGF-beta 1 （TGF-beta 1是膠原產生的重要因子）。如預料一樣，抗轉化生長因子抗體anti-TGF-beta 1 antibody 可以中和王漿酸的促進膠原產生的活性。這些結果顯示，作爲蜜蜂蜂王漿膠原產生的促進因子的王漿酸， 它可以借由誘導轉化生長因子的產生，促進AA-2G處理下的纖維芽母細胞的膠原產生。

用新鮮蜂王漿在小鼠上進行的抗疲勞效果的研究

我們用新鮮的蜂王漿（採集好后，立即儲藏在零下二十度的環境裏）在雄性Std ddY小鼠上 進行了抗疲勞效果的研究。首先，讓小鼠習慣于在水流可調節的游泳池内游泳。然後， 強制小鼠在兩周内游泳五次，在此期間測量小鼠到疲勞極點所需要的時間。這些小鼠在游泳前根 據相同的游泳能力被分成三個小組，RJ組（採集好后，立即儲藏在零下二十度的環境裏的蜂王漿）， 40-7dRJ組（連續7日儲存在40度的環境下的蜂王漿）和含有酪蛋白，太白粉和大豆油的對照溶液組。 所有的小鼠一次都要被強制游15分鐘，休息片刻后被強制游到極度疲勞，接著再被記錄下到疲勞極點所 需要的時間。與其他組相比較，RJ組顯示出明顯的游泳持久能力。RJ組在游泳后，沉積的血清乳酸和血氨 （serum amonia）明顯減少，肌肉糖元消耗也明顯減少。游泳后的40-7dRJ組和對照溶液組在這些參數 中相互之間沒有明顯差異。蜂王漿成分的定量分析顯示，5-7kDa蛋白質（先前被用來顯示蜂王漿新鮮程度 的指數）在40-7dRJ組中明顯減少。另一方面，RJ組中的多種維生素，10-hydroxy-2-decenoic acid和 其他脂肪酸沒有變化。這些結果顯示，蜂王漿能夠改善運動后的身體疲勞，小鼠上的蜂王漿抗疲勞效果 看來與蜂王漿的新鮮度有關（也許是5-7kDa蛋白質的容量）。